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DNA PAGE 膠回收試劑盒00 次說明書

DNA PAGE 膠回收試劑盒00 次說明書

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DNA PAGE 膠回收試劑盒00 次說明書是一種在較高溫度下保存 RNA 樣品的非凍型無毒溶液,它能 迅速滲入細胞內(nèi),通過高效抑制 RNase 的活性而保存 RNA 的完整性。

DNA PAGE 膠回收試劑盒00 次說明書 詳細資料

操作步驟:
  DNA PAGE 膠回收試劑盒00 次說明書切取含有目的DNA 片段的瓊脂糖凝膠條帶。
   ● 盡量切除不含有目的DNA 部分的凝膠,減少凝膠體積,提高DNA 回收率。
   ● 切膠時,請使用長波長UV  (360 nm )光盒。且不要將DNA 長時間暴露在紫外燈下,以防DNA 損傷。
2  稱取凝膠的重量近似地確定其體積。
   ● 凝膠重量的稱量方法:取.5 ml 離心管電子天平稱初質(zhì)量,切膠裝在離心管后稱終質(zhì)量,兩者差即為膠的質(zhì)量。不同離心管的重量可能有差異,因此,每個離心管的重量需單獨稱量。
3  按照每00 mg 瓊脂糖凝膠對應(yīng)00 µl 溶液BD 的比例,向離心管中加入溶液BD。
4  50 ℃水浴7-0min,直至凝膠*溶化。期間需要振蕩混合3 次。
   ● 瓊脂糖必須*融化,以免堵塞柱子,嚴重影響DNA 段的回收效率。
   ● 如果總體積大于500 µl,可適當增加溶膠時間。
   ● 若此時溶液變紅,可加0 µl 3M NaAC  (pH 5.2)。
5  將步驟4 所獲溶液置于DNA 純化柱中,靜置2min 。
   ● 膠塊*溶解后將膠溶液溫度降至室溫再上柱,因為純化柱在較高溫度時結(jié)合DNA  的能力較弱。
6  2,000 rpm 離心min。若溶液量大于DNA 純化柱的容積,可分兩次離心,棄濾液。
   ● 此時DNA 被吸附于DNA 純化柱中的硅膠膜上。
7  加入500 µl 溶液BD。2,000 rpm,  離心min,棄濾液
8  加入500 µl 溶液PE。2,000 rpm,  離心min,棄濾液。
   ● 溶液PE 初次使用前用無水乙醇按: 4 稀釋,即含80% 乙醇。
   ● 此步驟的作用是將硅膠膜上吸附的蛋白、鹽等雜質(zhì)洗脫,以獲得高質(zhì)量DNA 段。
9  加入500 µl 溶液PE。2,000 rpm,  離心min,棄濾液。
0 2,000 rpm 離心  3min ,以*去除純化柱中的液體。
   ● 此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續(xù)酶促反應(yīng)。同時也利于DNA 段的充分溶解。
  將離心柱置于新的.5 ml 離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-00 µl 溶液Eluent  (60℃預(yù)熱),靜置2min 。2,000 rpm  離心min,管底即為目的DNA 段。貯存于-20℃。
   ● 溶液Eluent 可用無菌雙蒸水代替,但其pH 需為8.0-8.5,加入體積視DNA 目的段的多少、用戶對目的濃度要求而定。
   ● 對溶液Eluent 60℃預(yù)熱,會提高提取DNA 目的段的產(chǎn)量。

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DNA PAGE 膠回收試劑盒00 次說明書

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注意事項:
DNA PAGE 膠回收試劑盒00 次說明書● 溶液PE *次使用前請按瓶上標簽加入4 倍體積的無水乙醇,即5 ml 溶液PE 中加入60 ml 無水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無水乙醇,使用后立即蓋緊蓋子。
● 本產(chǎn)品對電泳使用的Agarose 種類沒有嚴格限制,可以使用普通Agarose 。為了保證回收DNA 的質(zhì)量和DNA 回收效率,希望使用高純度的Agarose ,但沒有必要一定要使用低熔點的Agarose 等。
● 電泳時請使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液,以免影響電泳及回收效果。
● 請適當延長電泳時間,在條帶分離清晰后進行切膠回收,以免回收到多余雜帶。
● 為提高DNA 回收收率,切膠時應(yīng)盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強。但如果DNA 濃度小,或DNA 初始量少,回收率將會偏低。
● 溶液Eluent(0 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA 片段可直接用于各種酶促反應(yīng)等,不會影響后續(xù)試驗。
● 為了保證回收效率,請不要使用未調(diào)整pH 值的超純水洗脫目的片段。
● 請嚴格按照操作步驟操作。

問:常用的DNA 濃度及純度檢測方法有哪些?
DNA PAGE 膠回收試劑盒00 次說明書答:回收得到的DNA 片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過對比定量的Marker 來定量濃度;紫外分光檢測OD260/280 比值,OD260/280 比值在.7-.9 之間說明所得  DNA  純度較好,如果洗脫時不使用溶液Eluent而使用去離子水,比值會偏低,因為pH 值和離子存在會影響光吸收值,但不表示純度低。

問:長片段回收時應(yīng)注意哪些問題?
答:DNA PAGE 膠回收試劑盒00 次說明書當DNA 片段長度較長(5   kb 以上)時,回收效率會有所下降,這是DNA 切膠回收時的常見現(xiàn)象。此時建議按以下方法解決問題:
    適當增加待回收DNA 樣品的點樣量;
    2 由于長片段DNA 不易從樹脂上洗脫下來,建議洗脫兩次,可以提高洗脫效率;
    3 減少操作過程中對長片段DNA 的物理損傷,如混合振蕩操作不要過于劇烈,切膠時不要將DNA 長時間暴露在紫外等下。

甘草酸;甘草甜素;甘草皂苷 CAS 405-86-3 訂購|咨詢  規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支

(-)-倍兒茶酸 CAS 337-27-5 訂購|咨詢  規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial

2-O-alpha-L-鼠李吡喃糖甙鳶尾 CAS 943989-68-2 訂購|咨詢  規(guī)格: 20mg

長春瑞濱;Virelbine CAS 7486-22- 訂購|咨詢  規(guī)格: 20mg

異型南五味子丁素 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格: 20mg

山茱萸 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格: 0.5g

;純品型;標準品;有證書 CAS 訂購|咨詢  規(guī)格: 0.g

CAS  訂購|咨詢  規(guī)格: 約8mg

鳶尾苷 : 6-40-5 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

α-三聯(lián)噻吩 :  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

(+)-Nootkatone :  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

DNA PAGE 膠回收試劑盒00 次說明書糖脂抗體(glycolipid)elisa檢測試劑盒 英文名稱:glycolipid ELISA Kit, 英文縮寫:glycolipid,

卵母細胞凍存試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次

轉(zhuǎn)錄激活因子6(ATF6)elisa檢測試劑盒 英文名稱:ATF6 ELISA Kit, 英文縮寫:ATF6,

動物源性飼料牛源基因檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

沉默調(diào)節(jié)蛋白5(SIRT5)elisa檢測試劑盒 英文名稱:SIRT5 ELISA Kit, 英文縮寫:SIRT5,

組織PI3K激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

紅細胞生成素(EPO)elisa檢測試劑盒 英文名稱:EPO ELISA Kit, 英文縮寫:EPO,

酵母/真菌D-葡萄糖含量氧化法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)elisa檢測試劑盒 英文名稱:MUC5B ELISA Kit, 英文縮寫:MUC5B,

組織果糖-,6-二磷酸醛縮酶(ALD)定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

S00鈣結(jié)合蛋白A6/鈣粒蛋白A(S00A6)elisa檢測試劑盒 英文名稱:S00A6 ELISA Kit, 英文縮寫:S00A6,

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